生物技术检验检疫实践教程
内容简介
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本书内容与生物技术、生物工程专业理论课程配套, 介绍了利用生物技术的方法进行检验检疫实践, 主要包括生物信息分析基础、基因群生物信息分析、实时荧光定量PCR、实时荧光COLD-PCR检测点突变等。
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目录
1 基因电子克隆与初步生物信息分析基础实践1．1 实践目的与知识背景1．1．1 实践目的1．1．2 生物信息数据库1．1．3 热休克蛋白901．2 实践材料与方法1．2．1 生物信息学数据库和软件1．2．2 人类HSP90-β基因的电子克隆步骤1．2．3 人类HSP90-β基因的核酸和蛋白质序列分析1．3 实践结果与分析1．3．1 EST数据库的检索结果1．3．2 人类HSP90-β基因电子克隆1．3．3 人类HSP90-β基因的核酸序列分析1．4 实践体会1．5 小结2 含有某蛋白结构域基因群生物信息学分析实践2．1 实践目的与知识背景2．1．1 实践目的2．1．2 基因本体论2．1．3 Blast2GO2．1．4 Reticulon结构域2．2 实践材料与方法2．2．1 序列获取2．2．2 系统进化树分析2．2．3 Blast2GO功能注释2．2．4 目的基因选取2．2．5 疏水性分析2．2．6 跨膜结构分析2．2．7 结构域功能分析2．2．8 二级结构预测2．2．9 三级结构预测2．3 实践结果与分析2．3．1 水稻中含有Reticulon结构域基因2．3．2 系统进化树2．3．3 Blast2G0功能注释结果与目的基因选取2．3．4 疏水性分析2．3．5 跨膜结构分析2．3．6 结构域分析结果2．3．7 二级结构分析结果2．3．8 三级结构预测结果2．4 实践体会2．4．1 Blast2G02．4．2 进化树分析2．5 小结3 实时荧光PCR定量分析实践3．1 实践目的与知识背景3．1．1 实践目的3．1．2 水稻概述3．1．3 实时荧光定量PCR技术3．1．4 实时荧光定量PCR技术原理3．1．5 荧光定量PCR中两个重要的概念3．1．6 Ct值与起始模板的关系3．1．7 PCR熔解曲线3．1．8 管家基因的选择3．1．9 双标准曲线法原理3．1．10 本实践技术路线3．2 实践材料与方法3．2．1 主要仪器3．2．2 PCR引物制备3．2．3 cDNA模板的制备3．2．4 质粒构建3．2．5 其他试剂3．2．6 实时PCR扩增体系3．2．7 RQ-PCR扩增曲线条件3．2．8 RQ-PCR熔解曲线条件3．2．9 样本检测3．3 实践结果与分析3．3．1 RNA提取及电泳鉴定3．3．2 引物筛选结果3．3．3 Mg2+优化3．3．4 双标准曲线的制作3．3．5 水稻基因，LOC_Os01g45914时空表达情况3．4 实践体会3．4．1 实时定量PCR技术的优点3．4．2 降落PCR3．4．3 参照基因eEF-1α3．4．4 PCR反应体系条件优化3．4．5 结论3．4．6 展望3．5 小结4 实时荧光COLD-PCR检测点突变实践4．1 实践目的与知识背景4．1．1 实践目的4．1．2 白血病概述4．1．3 白血病发病机理4．1．4 白血病分子遗传学4．1．5 微小残留白血病及其检测4．1．6 基因突变的研究背景4．1．7 COLD-PCR技术4．1．8 COLD-PCR技术的应用4．1．9 其他PCR技术4．2 实践材料与方法4．2．1 实验仪器4．2．2 主要材料4．2．3 其他试剂4．2．4 染料法测定野生型、突变型熔点4．2．5 非COLD-PCR反应体系和反应程序的建立4．2．6 FAST-COLD-PCR反应体系和反应程序的建立4．2．7 灵敏度分析的模板准备4．3 实践结果与分析4．3．1 反应体系优化4．3．2 Mg2+浓度的优化4．3．3 不对称比例优化4．3．4 探针浓度优化4．3．5 灵敏度考察4．3．6 COLD-PCR程序的建立与优化4．3．7 COLD-PCR程序初步优化4．3．8 COLD-PCR程序再次优化4．3．9 COLD-PCR稳定性重复实践4．3．10 COLD-PCR灵敏度4．4 实践体会4．4．1 COLD-PCR技术的优点4．4．2 利用探针熔解曲线来检测突变的优缺点4．4．3 结论4．4．4 展望4．5 小结5 抗体金标记检测试纸制备与鉴定实践5．1 实践目的与知识背景5．1．1 实践目的5．1．2 黄曲霉毒素5．1．3 胶体金免疫层析技术5．1．4 胶体金免疫层析技术的应用5．2 实践材料与方法5．2．1 实践材料5．2．2 实践仪器5．2．3 实践方法5．3 实践结果与分析5．3．1 胶体金的紫外扫描鉴定5．3．2 试纸条灵敏度、特异性及其检测范围5．3．3 油脂样品的检测5．3．4 假阳性、假阴性的测定5．3．5 免疫层析试纸条的重现性5．3．6 免疫层析试纸条的稳定性5．4 实践体会5．4．1 结论5．4．2 改进5．5 小结6 基因芯片技术基础实践6．1 实践目的与知识背景6．1．1 实践目的6．1．2 生物芯片简介6．1．3 基因芯片制作方法6．1．4 基因芯片改性技术简介6．1．5 聚乳酸材料简介6．1．6 显色方法简介6．2 实践材料与方法6．2．1 仪器6．2．2 试剂6．2．3 溶液配制6．2．4 聚乳酸片6．2．5 DNA片段6．2．6 实践方法6．3 实践结果与分析6．3．1 4RF8基因扩增产物电泳图6．3．2 PLA芯片硅烷化前后比较图6．3．3 PLA芯片结果示意图6．4 实践体会6．4．1 结论6．4．2 改进6．5 小结7 高效液相色谱一串联质谱实践7．1 实践目的与知识背景7．1．1 实践目的7．1．2 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂7．1．3 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂检测方法发展现状7．1．4 检测方法的选择与建立7．1．5 本章实践主要过程7．2 实践材料与方法7．2．1 实践材料7．2．2 实践试剂7．2．3 实践仪器7．2．4 农药标准溶液配制7．2．5 样品处理7．3 实践结果与分析7．3．1 标准溶液色谱7．3．2 检测方法的选择与建立7．3．3 定性筛查7．3．4 定量分析与方法科学性验证7．3．5 方法精确度和准确度7．3．6 实际样品的测定7．4 实践体会7．5 小结8 GRISPR／CAS载体构建与转染实践8．1 实践目的与知识背景8．1．1 实践目的8．1．2 CRISPR／CAS系统概述8．1．3 CRISPR／CAS系统的广泛分布和分类8．1．4 hCdc6基因与结肠癌的发生8．2 实践材料与方法8．2．1 实践材料8．2．2 实践方法8．3 实践结果与分析8．3．1 目的载体PKS-hCdc6-target-A（flag／3flag）的构建8．3．2 PKS-hCdc6-C-target-final-flag／3flag载体构建8．3．3 目的载体与辅助载体的共转染与新型细胞系的筛选8．4 实践体会8．4．1 CRISPR／CAS系统介导的免疫机理8．4．2 影响小提中量质粒纯度的因素8．4．3 影响质粒转染效率的因素8．4．4 影响细胞传代效率的因素8．4．5 结论8．4．6 展望8．5 小结参考文献
封面
书名:生物技术检验检疫实践教程
作者:陈超，魏泉德主编
页数:142
定价:¥45.0
出版社:华南理工大学出版社
出版日期:2016-03-01
ISBN:9787562348559
PDF电子书大小:38MB 高清扫描完整版